Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych czesc 4

Zawarliśmy wiek, wiek, płeć i przekształcony log10 wskaźnik masy ciała jako współzmienne o ustalonych efektach i macierz zależności genetycznej, która przechwytuje strukturę populacji z przodków i pokrewieństwa, jako współzmienną efektu losowego. Następnie testowaliśmy powiązania między wariantem E40K (z kodowaniem jak opisano) i ryzykiem choroby wieńcowej za pomocą tego samego zestawu współzmiennych, z wyjątkiem indeksu masy ciała poddanego transformacji log10. Wskaźniki szans dla choroby tętnic wieńcowych zostały oszacowane za pomocą metodą krzywdzonej wiarygodności Firtha regresji logistycznej27 po dostosowaniu do wieku, wieku, płci i pierwszych czterech głównych składników pochodzenia. Oszacowaliśmy przedziały ufności 95% Wald dla ilorazów szans przy użyciu standardowych szacunków błędu wyliczonych z wartości P z mieszanych modeli liniowych asocjacji. Następnie wykorzystaliśmy te same ramy do testowania statystycznego, aby zidentyfikować powiązania pomiędzy nowymi mutacjami inaktywującymi ANGPTL4, które znaleziono w naszym badaniu, zagregowanymi w obrębie genu, 28 i wyżej wymienionymi cechami. Allele zostały zakodowane 0 dla noncarriers i dla nosicieli mutacji inaktywujących. Zgodnie z oczekiwaniami na podstawie niskich częstości alleli nie zaobserwowaliśmy żadnych homozygot na inne mutacje inaktywujące w jakimkolwiek miejscu wariantu. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych czesc 4”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych cd

Odczyty sekwencji zostały dostosowane do ludzkiej konstrukcji odniesienia GRCh37.p13. Warianty pojedynczych nukleotydów (SNV) i warianty sekwencji insercji i delecji (indel) zidentyfikowano za pomocą zestawu narzędzi do analizy genomu 21, 22 i opatrzono adnotacją za pomocą SnpEff.23 Mutacje inaktywujące zdefiniowano jako dowolne z poniższych: SNV prowadzące do przedwczesny kodon stop, utrata kodonu start lub utrata kodonu stop; SNV lub indele zakłócające kanoniczne splicingowe akceptorowe lub dinukleotydy donorowe; i indela z przesunięciem w otwartej ramce odczytu prowadzącą do utworzenia przedwczesnego kodonu stop. Pokazano również nośniki wariantu E40K, który blokuje hamowanie LPL przez ANGPTL4,24. Wszystkie pozycje są przedstawione na podstawie sekwencji referencyjnej dla transkryptu Ensembl ENST00000301455 (sekwencja RNA informacyjnego RefSeq, NM_139314). Zastosowaliśmy sekwencjonowanie Sangera, aby potwierdzić obecność pewnych mutacji inaktywujących, szczególnie w wariantach indelowych (patrz sekcja Metody w dodatkowym dodatku). Charakterystyka przeciwciał
Neutralizujące ANGPTL4, w pełni ludzkie przeciwciało monoklonalne (REGN1001), które zastosowano w tym badaniu, uzyskano przy użyciu technologii Velocimmune Regeneron.25 Wiązanie ludzkiej immunoglobuliny REG1100 z REGN1001 i małpy ANGPTL4 zmierzono za pomocą Biacore.26. REGN1001 indukowanego przez ANGPTL4 hamowania aktywności LPL określono za pomocą testu ciągłej fluorescencji lipidowej Confluolip (Progen) .26
Hamowanie ANGPTL4 u myszy
Testowaliśmy działanie REGN1001 u samców myszy o mieszanym podłożu genetycznym (C578Bl / 6NTac dla 62,5% i 129S6 / SvEvTac dla 37,5%), które były homozygotyczne dla ludzkiego ANGPTL4 i dla niedoboru ApoE. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych cd”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad

Poszukiwaliśmy dodatkowych dowodów allelicznych na efekty genetycznej inaktywacji ANGPTL4 poprzez zbadanie związków nowych rzadkich, inaktywujących mutacji w ANGPTL4 z poziomami lipidów i chorobą wieńcową. Na koniec zbadaliśmy, czy hamowanie przeciwciał przeciw Angptl4 miało podobny wpływ na metabolizm lipidów w modelach naczelnych mysich i nieludzkich. Metody
Przestudiuj badanie
Badania nad genetyką człowieka przeprowadzono w ramach projektu DiscovEHR Centrum Genetyki Regeneron i Systemu Zdrowia Geisinger. Badanie zostało zatwierdzone przez instytucjonalną komisję do spraw opinii w systemie opieki zdrowotnej Geisinger. Centrum Genetyki Regeneron sfinansowało zbieranie próbek do badań, generowanie danych dotyczących sekwencji oraz analizę danych klinicznych i sekwencji. Trzej pierwsi i ostatni trzej autorzy gwarantują dokładność i kompletność danych i wszystkich analiz. Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad”

Sól hydroksyetylowa lub sól fizjologiczna do resuscytacji płynów w intensywnej terapii AD 8

Wynikało to po części z wykluczenia pacjentów z krwotokiem wewnątrzczaszkowym i tych, których klinicyści prawdopodobnie nie przeżyli, oraz z włączeniem pacjentów poddanych planowej operacji. Ponadto pacjenci byli rekrutowani po przyjęciu na OIOM, kiedy wymagania dotyczące resuscytacji płynowej są często mniejsze niż w przypadku pacjentów w oddziale ratunkowym lub sali operacyjnej. Pomimo tych ograniczeń nasz proces miał wystarczającą moc statystyczną, aby wykryć absolutną różnicę umieralności o 3 punkty procentowe. Nasze wyniki są zgodne z efektem leczenia, który leży pomiędzy względnym spadkiem o 4% lub względnym wzrostem o 18% w przypadku śmiertelności wynikającej z resuscytacji z HES. Continue reading „Sól hydroksyetylowa lub sól fizjologiczna do resuscytacji płynów w intensywnej terapii AD 8”

Andexanet Alfa dla odwrócenia aktywności inhibitora czynnika Xa

Krwawienie jest powikłaniem leczenia inhibitorami czynnika Xa, ale nie ma specyficznych środków do odwrócenia działania tych leków. Andexanet jest przeznaczony do odwracania działania przeciwzakrzepowego inhibitorów czynnika Xa. Metody
Zdrowym starszym ochotnikom podawano codziennie 5 mg apiksabanu dwa razy na dobę lub 20 mg rywaroksabanu. Dla każdego inhibitora czynnika Xa przeprowadzono dwuczęściowe randomizowane badanie kontrolowane placebo w celu oceny i podania dawki w postaci bolusa lub bolusa plus 2-godzinny wlew. Pierwszorzędowym wynikiem była średnia procentowa zmiana aktywności anty-czynnik Xa, która jest miarą hamowania czynnika Xa przez antykoagulant.
Wyniki
Wśród uczestników leczonych apiksabanem aktywność anty-czynnik Xa została zmniejszona o 94% wśród osób, które otrzymały bolus andexanet (24 uczestników), w porównaniu z 21% wśród osób, które otrzymały placebo (9 uczestników) (P <0,001), oraz niezwiązane stężenie apiksabanu zmniejszono o 9,3 ng na mililitr w porównaniu do 1,9 ng na mililitr (P <0,001); Generacja trombiny została w pełni przywrócona w 100% w porównaniu do 11% uczestników (P <0,001) w ciągu 2 do 5 minut. Wśród uczestników leczonych rywaroksabanem aktywność anty-czynnik Xa została zmniejszona o 92% wśród osób, które otrzymały bolus andexanet (27 uczestników), w porównaniu z 18% wśród osób, które otrzymały placebo (14 uczestników) (P <0,001), oraz niezwiązane stężenie rywaroksabanu zmniejszono o 23,4 ng na mililitr w porównaniu do 4,2 ng na mililitr (P <0,001); Generacja trombiny została w pełni przywrócona w 96% w porównaniu do 7% uczestników (P <0,001). Continue reading „Andexanet Alfa dla odwrócenia aktywności inhibitora czynnika Xa”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 9

Nawet jeśli potencjalne korzyści wynikające z blokowania ANGPTL4 okazują się być ograniczone przez ryzyko limfadenopatii u ludzi, podobne korzyści terapeutyczne można jeszcze uzyskać poprzez blokowanie białek związanych z ANGPTL4, takich jak ANGPTL8 i ANGPTL3, z których żaden nie wydaje się być związany z limfadenopatią u zwierząt. Należy wykazać, że podobne zmniejszenie ryzyka choroby sercowo-naczyniowej będzie obserwowane w przypadku mutacji obniżających poziom trójglicerydów, wpływających na inne białka podobne do angiopoetyn, takie jak ANGPTL837 i ANGPTL338-40. Nasze badanie ma kilka ograniczeń. Po pierwsze, skupiliśmy się na poziomach lipidów i ryzyku choroby wieńcowej u uczestników ze znanym wariantem E40K związanym ze zmniejszoną funkcją i nosicielami mutacji splicingowej lub zmiany ramki odczytu lub przedwczesnych kodonów stop, start lub loss-of-stop. Prawdopodobieństwo, że mutacje te będą miały znaczący wpływ na funkcję białka ANGPTL4, jest wysokie. Jednakże nie można wykluczyć, że inne warianty kodujące lub regulacyjne warianty niekodujące mogą dostarczyć dodatkowego wglądu w fenotypowe efekty antagonizmu ANGPTL4. Po drugie, nie wiadomo, czy nasze obserwacje będą uogólniane na osoby o pozaeuropejskich korzeniach. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 9”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 8

W tym badaniu odkryliśmy, że obecność wariantu E40K wiązała się z 19% niższym ryzykiem choroby wieńcowej niż ryzyko wśród homozygot E40. Ponadto odkryliśmy, że inne rzadkie nowe mutacje, które przewidywały dezaktywację jednego allelu ANGPTL4, również wiązały się ze zmniejszonym ryzykiem choroby sercowo-naczyniowej. W czasie poszukiwania wariantów kodujących związanych z chorobą wieńcową opisywanych obecnie w Journal, Stitziel i współpracownicy34 stwierdzili podobne zmniejszenie ryzyka choroby wieńcowej u pacjentów z E40K i innymi mutacjami inaktywującymi ANGPTL4. Wyniki te dostarczają niezależnych dowodów allelicznych, że genetyczna utrata funkcji ANGPTL4 zapewnia korzystne profile lipidowe i ochronę przed chorobą wieńcową. Stwierdziliśmy, że hamowanie przeciwciał monoklonalnych ANGPTL4 u myszy i naczelnych innych niż człowiek obniża poziomy triglicerydów – odkrycie zgodne z wynikami u myszy z niedoborem Angptl415,32 – co dostarcza dodatkowych dowodów na to, że modulacja ANGPTL4 wpływa na metabolizm trójglicerydów. Kilka mechanizmów może łączyć utratę funkcji ANGPTL4 z ochroną przed miażdżycową chorobą wieńcową. Przez całe życie, genetycznie zdeterminowane obniżenie poziomu triglicerydów może zmniejszyć obciążenie aterogennymi lipoproteinami bogatymi w triglicerydy. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 8”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 7

Jak odkryliśmy u myszy, zaobserwowaliśmy akumulację lipidów w krezkowych węzłach chłonnych u trzech z sześciu uśmierconych samic małp w tygodniu 14 i u jednej z czterech samic małp, które przeszły 15-tygodniowy okres rekonwalescencji. Nie zaobserwowaliśmy żadnej takiej limfadenopatii u samców małp. W badaniu z udziałem pięciu otyłych rezusów z dyslipidemią cztery z tych, które otrzymały REGN1001 miały względny spadek od linii bazowej o 60% w krążących poziomach triglicerydów, które osiągnęły najniższy poziom w ciągu 2 dni po podaniu leku (Figura 2C). Względna redukcja była jeszcze bardziej wyraźna u pojedynczej małpy, która miała wyjściowy poziom triglicerydów w osoczu ponad 1500 mg na decylitr (16,9 mmol na litr) (Figura 2D). U tej małpy leczenie za pomocą REGN1001 zmniejszyło poziomy triglicerydów o ponad 95%, do średniej (. SE) o 76 . 14 mg na decylitr (0,86 . Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 7”

Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 6

Homozygoty K40 miały liczbowo mniejsze ryzyko choroby niedokrwiennej serca niż homozygoty E40 (iloraz szans, 0,32, 95% CI, 0,06 do 1,09, P = 0,07). Nowe mutacje inaktywujące ANGPTL4, które zidentyfikowaliśmy, były również rzadsze wśród uczestników z chorobą wieńcową niż w grupie kontrolnej. W sumie 13 z 10 552 uczestników z chorobą wieńcową (skumulowana częstość alleli, 0,06%) i 58 z 29 223 kontroli (skumulowana częstość alleli, 0,1%) niosło mutację inaktywującą. Po dostosowaniu do wieku, płci i pochodzenia, obecność mutacji dezaktywującej dała o 44% niższe szanse na chorobę wieńcową niż szanse bez mutacji dezaktywującej (iloraz szans, 0,56, 95% CI, 0,32 do 1,00; P = 0,05 ) (Tabela 3). Dalsze dostosowanie w odniesieniu do stanu w odniesieniu do cukrzycy typu 2, palenia tytoniu i nadciśnienia nie zmieniło istotnie związku między chorobą wieńcową a E40K lub innymi mutacjami inaktywującymi w ANGPTL4 (tabela S5 w dodatkowym dodatku).
Modulowanie ANGPTL4 u myszy i małp
Figura 2. Figura 2. Continue reading „Inaktywacja wariantów w ANGPTL4 i ryzyko choroby niedokrwiennej naczyń wieńcowych ad 6”

Andexanet Alfa dla odwrócenia aktywności inhibitora czynnika Xa ad 6

Aktywność anty-czynnik Xa stopniowo powracała do poziomów obserwowanych u uczestników otrzymujących placebo. Gdy andeksanet był podawany w bolusie z 2-godzinną infuzją, zmniejszał aktywność anty-czynnik Xa w większym stopniu niż placebo, zarówno w badaniu apiksabanu (92 . 3% w porównaniu z 33 . 6%, P <0,001 ) oraz w badaniu rywaroksabanu (97 . 2% w porównaniu z 45 . 12%, P <0,001) (Ryc. 1C i 1D). Continue reading „Andexanet Alfa dla odwrócenia aktywności inhibitora czynnika Xa ad 6”